Programa de Estudio y Control de Enfermedades Tropicales, Universidad de Antioquia, Medellín - Colciencias, Colombia. http://pecet-colombia.org/es/

Introducción. 

La quinasa AKT pertenece a la ruta de señalización PI3K, participa en la sobrevivencia celular y es considerada una importante diana terapéutica en cáncer.  Este trabajo pretende demostrar el papel de AKT-like en la sobrevivencia de  tripanosomátidos y como un posible blanco terapéutico.  

Materiales y métodos. 

El gen AKT-like de L. panamensis (UA-140) se clonó en el vector pGEM^®-T Easy, y la estructura 3D de la quinasa fue modelada en el servidor I-Tasser. Se realizó docking (AutoDock Vina 1.1.2) entre el domino pleckstrin (PH) y una sub-librería de la base datos ZINC. Parásitos a 26°C y en medio Schneider´s fueron evaluados por  citometría de flujo (IP y DIOC₆) en ausencia de suero fetal bovino durante 24 horas o aumentando la temperatura a 37°C durante una hora, como condiciones de estrés. Los parásitos intracelulares fueron evaluados por citometría-GFP para Leishmania y actividad β-galactosidasa para Trypanosoma cruzi.  La secuencia AKT-like de Trypanosoma cruzi se extrajo de GeneDB.

Resultados. 

El docking identificó 6/600.000 compuestos con valores superiores a -10 kcal/mol. La citometría de flujo demostró un alto porcentaje de hipodiploidía en los parásitos estresados y en presencia del compuesto UBMC1, con pérdida del potencial de membrana mitocondrial. La inhibición de la proliferación en parásitos intracelulares de Trypanosoma cruzi fue muy efectiva: IC₅₀ 3,3±0,7µM, pero no en Leishmania  >40 µM y en macrófagos humanos la IC₅₀ fue de 29±1,2 µM.  

Conclusiones. La AKT-like está implicada en sobrevivencia y la inhibición del dominio PH según el modelo resultó letal en promastigotes estresados y en tripomastigotes/amastigotes de Trypanosoma cruzi.